Flere enzymer som vanligvis brukes i PCR-eksperimenter

Polymerasekjedereaksjon, forkortet somPCRpå engelsk, er en molekylærbiologisk teknikk som brukes til å amplifisere spesifikke DNA-fragmenter.Det kan betraktes som en spesiell DNA-replikasjon utenfor kroppen, som i stor grad kan øke en svært liten mengde DNA.I løpet av helePCRreaksjonsprosessen spiller en klasse stoffer en viktig rolle - enzymer.

1. Taq DNA

I eksperimenter i de tidlige dagene avPCR, brukte forskere Escherichia coli DNA-polymerase I, Men det er et problem med dette enzymet: det må fylle på nytt enzym hver gang en syklus utføres, noe som gjør operasjonstrinnene litt kompliserte og det er vanskelig å forsterke helt automatisk.Dette problemet ble løst etter at forskere ved et uhell isolerte Taq DNA-polymerase fra Thermus aquaticus i 1988. Siden den gang har den automatiske amplifiseringen av DNA blitt en realitet.Oppdagelsen av dette enzymet gjør ogsåPCRteknologi en praktisk, praktisk og universell teknologi.For tiden er Taq DNA-polymerase den vanligste polymerasen i DNA-sett.

2. PfuDNA

Som nevnt ovenfor har Taq DNase en stor feil, så forskere har modifisert Taq DNA-polymerase til en viss grad for å unngå uspesifikk amplifikasjon på grunn av feiltilpasning, noe som resulterer i unøyaktige testresultater.Men modifikasjonen av Taq DNA-polymerase kan hemme aktiviteten til DNA-polymerase ved romtemperatur.PfuDNA-polymerase kan godt gjøre opp for de ovennevnte ulempene ved Taq DNA-polymerase, slik at PCR-reaksjonen kan utføres normalt, og suksessraten for målgenamplifikasjon kan forbedres effektivt.

3. Revers transkriptase

Revers transkriptase ble oppdaget i 1970. Dette enzymet bruker RNA som mal, dNTP som substrat, følger prinsippet om baseparing, og syntetiserer en enkelt DNA-tråd komplementær til RNA-malen i 5'-3'-retningen.Revers transkriptase er først og fremst avhengig av DNA-polymeraseaktivitet fra DNA- eller RNA-maler og har derfor ingen 3′-5′ eksonukleaseaktivitet.Imidlertid har den RNase H-aktivitet, som begrenser synteselengden til revers transkriptase til en viss grad.På grunn av den lave trofastheten og termostabiliteten til vill revers transkriptase, modifiserte forskere den også.

TilPCReksperimenter, er de viktigste forbruksmaterialene: individuelle PCR-rør, 4/8-strips PCR-rør, PCR-plater.

LabiosPCR forbruksvarerhar følgendefordeler:

PCR plater: Bred termisk cycler-kompatibilitet;Høy kontrast, enkel brønnidentifikasjon;godt fluorescerende refleksjon; bravarmeoverføring;Sertifisert DNase, RNase, DNA, PCR-hemmere og testet pyrogenfri.

Individuelle PCR-rør: Fordampningsbestandig; bravarmeoverføring;utmerket optisk klarhet; Sertifisert DNase, RNase, DNA, PCR-hemmere og testet pyrogenfri.

4/8-strips PCR-rør: Ultra-tynne vegger; høy klarhet; god fluorescensrefleksjon;kan brukes i farmasøytisk industri, næringsmiddelindustri og molekylærbiologi; høykvalitets, jomfruelig PP-materiale; sertifisert DNase, RNase, DNA, PCR-hemmere og testet pyrogenfri.